生物制药工艺学-核酸类药物 下载

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TXT版90第一节核酸类物质的分离提取及其发酵生产一、RNA与DNA的提取与制备（一）RNA的提取与制备1.工业用RNA的提取（1）RNA及其工业来源从微生物中提取RNA是工业上最实际和有效的方法。通常在细菌中RNA占5％-25％，在酵母中占2.7％～15％，在霉菌中占0.7~28,面包酵母含RNA4.1％～7.2％。培养酵母菌体收率高，易于提取RNA，在工业上主要由RNA生产5‘－核苷酸。（3）用工业废水培养高含量RNA酵母减少环境污染，降低粮食消耗（4）RNA的提取实例啤酒酵母是提取RNA的很好的资源。取100g压榨啤酒酵母（含水70％），加入230ml含NaOH3g的水，20℃以下搅拌30min。用6mol/LHCl调至pH7，搅拌15分钟，离心得上清液255ml。冷至10℃以下，6mol/LHCl调pH2.5，置冷过夜，离心等RNA1.8g（纯度80％）。2.具有生物活性DNA的制备动物内脏加4倍量生理盐水经组织捣碎机捣碎1分钟，匀浆于2500rpm离心30分钟，沉淀用同样体积的生理盐水洗涤3次，每次洗涤后离心，将沉淀悬浮于20倍量的冷生理盐水中，再捣碎3分钟，加入2倍量5％十二烷基磺酸钠，并搅拌2～3小时，在0℃2500rpm离心，在上层液中加入等体积的冷乙醇，离心即可得纤维状DNA，再用冷乙醇和丙酮洗涤，减压低温干燥得粗品DNA。此资料来自于
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